相信開展過維生素檢測的小伙伴們，已經體驗到了微生物法檢測維生素的“難”了。試驗中總是出現諸多問題——活化菌株不成功，標準曲線異常，檢測結果回收率偏高或者偏低，重復性差等。為何此種方法如此難做，國標還將葉酸、B12、生物素、泛酸的微生物檢測方法作為首選方法和仲裁方法呢?
微生物法根據菌株必須依賴特定維生素才能生長的原理，利用比濁法測定細菌繁殖程度或代謝產物，間接對該維生素進行定量測定。該方法特異性強，靈敏度高，也是國際上廣泛使用的方法。微生物法檢測的是具有生物活性可以被吸收利用的維生素總量，這是儀器分析方法很難做到的。
“難”在哪里呢？是否有解決辦法呢？
“難”點一：菌株活化、保存、定期轉種以及接種液制備
鼠李糖乳桿菌ATCC7469、植物乳桿菌ATCC8014、萊士曼氏乳桿菌ATCC7830，這三株菌中當屬萊士曼氏乳桿菌最為嬌貴，常有活化失敗的案例發生。建議大家購買此菌后，第一次活化時需嚴格按照ATCC說明書上方法先接種于MRS肉湯中35℃，有氧培養48h，之后轉種血平板于35℃，厭氧培養48h，方可活化成功。此外，每次做微生物法檢測維生素試驗前，需提前用一周時間來活化儲備菌種，連續傳種2代～3代恢復細菌活力后，方可使用。接種液的制備因項目不同而處理方法不同，筆者不再贅述，只強調一點：方法中只給出大致菌液濃度范圍即“透光率60%～80%之間”，具體調成多少濃度，還需實驗者根據菌株狀態和試驗經驗進行制備。
此產品真空包裝，菌濃度定量制備且符合國標要求，直接加入培養基中即可使用，既可保證菌株活性又可免去活菌、洗菌、調菌濃度等繁瑣操作，方便、簡單、準確！同時，我司還提供了標準菌株的來源說明，可存檔溯源。
![維生素即用型產品——解決您的“難”點]( "維生素即用型產品——解決您的“難”點")
目前標準中，要求標準品的純度需要≥99%。通常購買到的標準品純度都不夠，因此需要折算后進行稱量，具體算法為：
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稱量后按照國標要求逐步稀釋，依次配制標準儲備液、中間液和工作液。配制時，需要注意——以下幾點：
標準品精確稱量，應使用足夠精度的天平進行標準品的稱量；
不同維生素種類使用不同的溶解液，溶解需充分搖勻，每次定容都需十分精準；
使用棕色容量瓶進行標準溶液的配制，應注意不同維生素種類的標準儲備液、中間液和工作液的保存條件及效期；
國標規定配制使用的水為二級水，所用的試劑比如NaOH、乙醇等為分析純或者更高級別。
標準溶液的配制過程復雜、步驟較多、對操作人員的技術水平要求比較高，配制的準確與否會直接影響檢測結果的準確性，導致回收率偏高或者偏低的情況發生。
我司推出凍干定量標準品，只需使用無菌水復溶，充分震蕩混勻，即可使用。一“鍵”操作即可免去大家進行標準品稱量、配制、稀釋、保存等復雜的工作。同時我司還提供了標準品來源說明，可溯源，請放心使用。
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制備維生素測定培養基，三角瓶需專用，不可與配制其他培養基的三角瓶混用，否則易混入目標維生素的成分；
培養基配制用水，必須使用GB/T6682規定的二級水；
維生素測定培養基中，含有很多不耐熱、易變性成分，高壓滅菌時需注意不可過度加熱。此外，滅菌后應及時將測定系列管從高壓鍋中拿出，放入冷水中快速降溫；
操作繁瑣，耗時。需先將培養基分裝系列測試管，滅菌，再接種菌液，此操作過程繁瑣易污染，稍有不慎就會導致試驗失敗。
即用型培養基，已滅菌處理，加入菌球混勻后，直接分裝到系列試驗管中，只需“一步”即可完成接種操作，替代國標中培養基滅菌和接種菌液的“兩步”工作，解決上述“難”點的同時，大大節約時間，提高工作效率。
維生素檢測過程所涉及的所有器皿，包括容量瓶，吸管，三角瓶，試管，試管塞等均需處理，方可使用。此外，建議每個項目器皿專用，不要混用，避免干擾。
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維生素即用型產品，配套使用無菌試管，避免試管，試管塞清洗，酸泡，熱處理的麻煩，極大程度的去除維生素檢測的干擾因素，提高工作效率的同時，保證結果的準確性。
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維生素即用型產品——可有效解決國標法檢測試驗過程中的所有“難”點！減少人員操作誤差，提升試驗結果的準確性，并可極大程度的提高檢測效率！
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